黄连中小檗碱提取的方法及其影响因素的分析

徐龙广 于鑫鑫 （大庆志飞生物化工有限公司 黑龙江大庆 163411）

从发现黄连药用功效开始，我国对其的研究已经有400余年的历史。随着医药科学的不断进步，小檗碱作为黄连的主要有效成分，已经显示出越来越多的医药功效。各种经过改进、运用最新技术的提取方法为黄连小檗碱的提取和规模化生产提供了新的思路和途径，为更进一步研究小檗碱的药用功效奠定了坚实的基础。

黄连为多年生草本植物，喜冷凉、湿润之处，属毛莨科黄连属。根茎黄色，常分枝，密生多数须根。叶全部基生。叶柄长5~12厘米，叶片坚纸质，卵状三角形，宽达10厘米。自古以来，黄连就被当做中药的治疗药材被人们使用。黄连始载于东汉《神农本草经》，列为上品，历代本草均有记载。 《本草纲目》云:“其根连珠而色黄，故名”。现代研究表明黄连的主要有效成分为生物碱，其中小檗碱含量最高，达10%左右。因最初发现黄连具有抗菌，抗病毒功效，临床上一直作为清热解读和抗感染药物，主要是用来治疗肠道细菌感染性疾病。近年来随着临床药理学的不断深入研究，陆续发现其还有抗心律失常药物，降血糖，降血脂，抗肿瘤等药理作用，被广泛用于心律失常、心力衰竭、高脂血症、防治癌症等治疗。因此，提取黄连中生物碱对于临床研究和治疗有着重要的意义，作者查阅资料并结合实际情况，开展了对黄连中小檗碱的提取研究，现介绍如下。

1 提取方法

煎煮法是将药材加水煎煮,去渣取汁的方法。本方法适用于有效成分能溶于或微溶于水,且对湿热均较稳定的中药材。他除用于制备汤剂外,同时也是提取中药材某些有效成分用于制备散剂、丸剂、片剂、冲剂及注射剂的基本方法之一。本方法的优点是操作方法简单、易懂、仪器容易获得，缺点是回收效率会受到环境的影响较大。

稀硫酸法主要是利用小檗碱的硫酸盐在酸性中的溶解度大，而盐酸盐几乎不溶于水的性质，首先将小檗碱转变为硫酸盐溶于酸，然后加盐酸再转化为盐酸盐而析出。本方法的优点是实验材料容易得到、工艺简单，缺点是容易在提取过程中造成污染，提取设备容易受到腐蚀。

随着科技的进步超声波提取技术的使用范围已经在生物医药行业逐渐扩大。此方法的原理是利用超声波产生的强烈震动、空化效应、搅拌作用等加速植物有效成分溶入溶剂，使得黄连中有效成分小檗碱的提取效力得到提高、提取时间缩短、操作步骤简单。但其缺点是增加了提取过程中设备和仪器的投入，操作时也必须有专业有素的人员进行。

液膜法是根据分离组分在膜中溶解度和扩散系数不同（www.nczfj.com），从而导致分离组分在膜中渗透速度不同实现分析的方法。有研究表明该方法中的液膜起到了分离作用和富集作用，是值得推广的方法。

2 影响因素

材料。高效液相色谱仪：Agilent 1100，梅特勒电子分析天平，中药饮片（购于安徽省康谱医药有限公司），盐酸小檗碱对照品购自由中国药品生物制品检定所，乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为纯化水。

方法。根据黄连的性质制定提取路线，以达到有效成分提取充分的目的，用乙醇对黄连单独提取，以盐酸小檗碱的含量和出固率为指标并讨论部分试验影响因素。色谱条件流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（40∶60，每100毫升加十二烷基磺酸钠0.12克）。检测波长为265纳米，流速为1毫升/分钟。柱温为室温。理论板数按盐酸小檗碱计算不低于10 000。精密称取减压干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品适量，制成每1毫升中含盐酸小檗碱21.84微克的对照品溶液。分别精密吸取对照品溶液5、10、15、20、30微克注入液相色谱仪，以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标得回归方程。固定其他提取因素不变，黄连加（60%、70%、80%）乙醇回流提取3次，每次加药材10倍量醇，提取1小时改变，考察其变化对提取结果的影响。

乙醇浓度。当乙醇浓度为60%时盐酸小檗碱含量为63.4毫克/克，出固率为25.3%。当乙醇浓度为70%时盐酸小檗碱含量为78.2毫克/克，出固率为34.1%。当乙醇浓度为80%时盐酸小檗碱含量为72.4毫克/克，出固率为30.9%。由此可见，乙醇浓度对黄连中有效生物碱成分-小檗碱的提取率有一定的影响，当固定其他步骤后，乙醇浓度为70%时，提取效率高于80%、60%乙醇浓度。