常用饲料卫生检验分析的方法

张桂芳 （黑龙江省鹤岗市动物疫病预防控制中心 154100）

气相色谱法（Gas chromatography，GC）。以气体作为流动相对混合组分进行分离分析的一种色谱方法。此法特别适用于分子量小于300，加热有一定挥发性物质的分析。目前，多种真菌毒素、有机磷农药、有机氯农药的气相色谱分析已有报道。

高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography,HPLC）。利用高压输送的液体作为流动相的一种色谱方法。该方法由于采用高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器，因而具有高压、高速、高效和高灵敏度等优点。HPLC是将样品制成溶液进样，不经过气化，所以不受样品挥发性的约束。故尤其适用于一些挥发性低、热稳定性差、分子量较大的高分子化合物及离子型化合物的分离分析。在饲料卫生检验中，此法已用于黄曲霉毒素、有机磷农药以及有机氯农药等分析。

薄层层析法（Thin Layer Chromatography,TLC）。将固定相均匀地涂布于玻板上制成薄层，以液体作为流动相，对混合组分进行分离、定性、定量的一种方法。薄层层析法是一种经典色谱方法，由于他具有不需要任何仪器设备，操作简便、快速、灵敏度高、分离效果好等优点，因而在饲料毒物分析中应用十分广泛。

原子吸收分光光度法（Atomic Absorptive Spectrometer,AAS）。利用待测元素的基态原子蒸汽对特定波长的谱线光有吸收作用，根据特征性谱线光被吸收的程度来测定试样中待测元素含量的方法。AAS是测定进素元素含量的重要手段之一。本方法具有选择性好（通常情况下共存元素不产生干扰，试样不需纯化）、灵敏度高、重现性好、分析速度快等优点。因而被作为饲料卫生检验的标准方法之一。缺点是对不同的分析项目，其测定条件不同，特别是要求具有不同的光源灯。另外，仪器昂贵，因此，其应用面和程度受到限制。

紫外-可见分光光度法。根据朗-比耳定律，当一束平行的单色光通过某一种均匀透明的稀溶液时，溶液的吸光度（或称光密度）等于吸光系数乘以溶液的厚度乘以溶液的浓度，即A=K×C×L，K表示某种物质溶液对某特定波长光的吸收能力,与溶液的浓度及厚度无关，即吸光系数。C为溶液浓度，L为溶液厚度。紫外-可见光光度仪即根据这一原理，用棱镜或光栅将光源的光线分成单色光，用一定厚度的液槽（或称比色杯，常用0.5、1、2、5厘米），通过比较待测液与标准溶液的吸光度，求出待测溶液的浓度。紫外光源用于测定具有共轭双键结构的无色物质，可见光源用于测定一般的有色物质。本法灵敏度高，操作简便，快速，廉价，因而在饲料卫生检验上应用很广。近年来又出现了双波长分光光度法（Dualwavelength Spectrophotometry）。这是一种新技术，不用参比液，而是选用两种不同的波长，λ1与λ2的光束通过一个样品,测定在这两种波长下的吸收度差值，其中λ1下的吸收度为参比吸收度，λ2下的吸收度为测量吸收度。此法最突出的优越性是不仅对吸收光谱互相重叠的混合样品可以不经分离直接测定，而且可以测定混浊样品。

荧光分析法（Fluorescence analysis）。（www.nczfj.com）利用某些物质的分子能吸收能量而发射出荧光，根据荧光的光谱和强度，对物质进行定性或定量的方法。荧光分析法具有灵敏度高、选择性强、试样用量少、方法简便和能提供较多的理论参数等优点，它的测定下限通常比分光光度法低2~4个数量，其检出限可达微克/升乃至纳克/升级。在饲料卫生检验中，常用于黄曲霉素、苯并芘、铅等物质的测定。但从总的来说，由于能产生荧光的物质不是很多，故应用范围不如分光光度法。

离子选择电极法。通过测定原电池电位的变化，来对被测定溶液中某离子的浓度进行定量的一种分析方法。根据电化学原理，在一个由参比电极和某种特定电极（如氟电极等）组成原电池中，原电池的电位与溶液中该离子的活度之对数成正比。本法操作极为简便，灵敏度较高，且样品不需作复杂的处理。但本法尚有一些缺点，主要是精度差，重现性不好，需进一步完善。目前离子选择电极的品种很多，有钾、钠、钙、氟等。在食品卫生检验中作为标准的分析方法是氟离子选择电极法。按构造可分为固相膜电极、液相膜电极和隔膜电极。

放射免疫测定法（Radio Immuno Assay RIA）。一种将放射性同位素测量和免疫反应原理相结合的同位素体外检测法。