副猪嗜血杆菌病的病原、致病机理与检疫

徐　毅

（毕节职业技术学院　551700）

1　病原及致病机理

副猪嗜血杆菌病是由副猪嗜血杆菌感染所引起。该病是1910年由德国人革拉斯（Glasser）首次报道，因此又叫革拉斯氏病（Glasser´sdisease）。[1]

1.1　病原

副猪嗜血杆菌属于巴氏杆菌科猪嗜血杆菌属，为革兰氏阴性杆菌。其形状有球杆状、细长杆状、丝状等；菌体有菌毛、荚膜及膜外蛋白等特殊结构。副猪嗜血杆菌酶系统不全，必须要借助动物血液中的V因子（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸[NAD]和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸[NADP]）作为氧化还原代谢过程的脱氢辅酶，因此，对副猪嗜血杆菌的培养，必须加入V因子才能生长繁殖。

副猪嗜血杆菌的最佳生长温度是37℃，在60℃下5～20分钟即可将其杀灭；普通消毒剂就可将其杀死。

副猪嗜血杆菌的血清型按照琼脂扩散血清分型方法进行分型，目前已经分离出至少有15个血清型，其中，毒力最强的有1、5、10、12、13、14六种血清型菌株；中等毒力的有2、4、8、15四种血清型菌株；毒力弱的是3、6、7、9、11五种血清型菌株。另外，还有约20%的分离菌株目前尚未定型。副猪嗜血杆菌的血清型具有区域差异性，在不同地区的病猪体内分离出的同一血清型菌株其毒性存有明显差异。

1.2　致病机理

副猪嗜血杆菌平时可存在于猪的上呼吸道黏膜及扁桃体陷窝，当猪只呼吸道黏膜受到损害，或感染其他病，或发生应急性反应等情况而导致机体免疫力下降时，副猪嗜血杆菌便乘机侵入机体，引发本病。副猪嗜血杆菌的毒力因子主要有菌毛、荚膜、内毒素、神经氨酸苷酶、细菌生物膜、膜外蛋白等[2]。

副猪嗜血杆菌的菌毛可以使其黏附在猪的呼吸道黏膜并侵袭机体；荚膜可以抵抗动物体内血液中杀菌活性物质的攻击、吞噬细胞的吞噬作用和某些药物的抑杀作用；内毒素是由菌体裂解而释放，其主要成分是脂多糖，进入机体后，刺激动物机体单核细胞、巨噬细胞等释放白介素-1、白介素-2、肿瘤坏死因子、干扰素等多种内源性致热原及促炎因子，这些因子一方面作为基本信息分子以不同的途径将发热信号传入体温调节中枢，使动物产热大于散热，体温升高，另一方面作用于机体的多种组织器官，特别是免疫系统和血管内皮系统，导致炎症级联反应，使微循环血管壁的通透性增加，形成器官组织的局灶性淤血、水肿及炎症病变。[3]同时，脂多糖还可以通过促进血液内凝血酶的生成而引起弥散性血管内凝血，病情长者能导致肝细胞损伤，引起机体代谢障碍，继而引起疾病营养不良性消瘦[4]；细菌生物膜具有黏附作用，并抑制中性白细胞和淋巴细胞对细菌的特异性和非特异性免疫，使细菌逃逸动物机体免疫系统对膜内菌体的清杀。神经氨酸苷酶与透酶、醛缩酶协调作用，除通过夺取宿主细胞的碳水化合物而增强细菌毒力外，还通过降低黏蛋白的黏性以干扰宿主的防御系统。

1.3　组织器官病变

感官组织病变。胸腔病变：膈胸膜、肋胸膜、肺胸膜、心包胸膜发生纤维素性渗出性炎症病变，胸水和心包液增多，颜色淡红，有干酪样纤维素性渗出物，后期的胸膜和心包膜出现假膜，严重时胸腔的脏层浆膜和壁层浆膜以及心包的内外膜发生黏连。腹腔病变：腹膜发生不同程度的纤维素性渗出性炎症病变，腹水增多，有纤维素性渗出物出现。

关节腔病变：关节囊发生炎症性肿胀，囊内膜出现纤维素性渗出性炎症病变，关节液增多，呈谈红黄色，有纤维素性渗出性物，后期呈谈红黄色胶胨样；关节面上因为有纤维素性渗出性物和坏死物而变得粗糙。

脑髓和脊髓病变：在脑髓的蛛网膜下腔和脑室以及脊髓的中央管，炎性渗出液增多，呈淡黄红色，有纤维素性渗出性物。

实质性器官病变：在心、肺、肾等实质性器官出现局灶性充血、淤血、出血甚至坏死。全身淋巴结肿大，色暗红，切面呈大理石花纹。[5]

镜检组织病变。病料经H.E染色镜检，可见病变组织内有现渗出性浆液和深红色纤维素样变；同时出现红血球、中性白血球、单核球、淋巴球浸润；可见球杆状或细长杆丝状的副猪嗜血杆菌菌体。

2.　检疫

2..1　宰前检验

流行特点。副猪嗜血杆菌主要感染高度健康的猪和不带特异病原的猪易感，通常见于4～8周龄的猪，为地方流行性。副猪嗜血杆菌病发生的主要原因是副猪嗜血杆菌的入侵，凡能使猪只机体抗病免疫力下降的因素，如营养不良、应激反应以及患有其他疾病等都会引起副猪嗜血杆菌病的发生。

临床症状。病猪发热，体温为40～41℃；食欲不振，被毛零乱，逐渐消瘦；可视黏膜发绀，鼻孔有黏液性及浆液性分泌物，呼吸困难，咳嗽，尖叫；关节肿胀、跛行；严重时皮肤发红，耳朵发绀，不能站立，步态僵硬、震颤、共济失调。一般死亡期3天左右，少数病例会发生突然死亡。

2..2　宰后检验

病理组织检查。根据感官组织病变和显微检查及可做出鉴定。

病原学鉴定。对副猪嗜血杆菌病的最终定性，要以副猪嗜血杆菌的定性检验结果为准。

方法一：用病猪的心、肺、淋巴结等器官组织做成病料涂片，用H.E染色，镜检。如果是副猪嗜血杆菌病，可见到球杆状或细长杆丝状的副猪嗜血杆菌菌体。

方法二：葡萄糖蛋白胨V因子培养液发酵试验。原理：副猪嗜血杆菌酶系统不全，必须要借助V因子（NAD和NADP）作为氧化还原代谢过程的脱氢辅酶，在对副猪嗜血杆菌的培养，只有在培养基中加入V因子，副猪嗜血杆菌才能繁殖生长，并在繁殖生长过程将葡萄糖发酵分解产生乳酸，使培养基由蓝变黄。方法及结果判定：将待检菌株分别接种到没有加入V因子和加入V因子（5uL0.01%的NAD）的两支葡萄糖蛋白胨液培养液试管中，将试管置于5%的二氧化碳培养箱内，在37℃温度下培养24～48小时后观察。如果加有V因子的一管颜色由蓝变黄，而另一管不变，则可确定所检菌株是副猪嗜血杆菌。

方法三：鲜血琼脂平板加金黄色葡萄球菌共同培养试验。原理：金黄色葡萄球菌在鲜血琼脂平板培养基上繁殖生长时能产生提供副猪嗜血杆菌繁殖生长所必须V因子（均匀向四周扩散）。

方法及结果判定：先将待检疑似细菌接种在鲜血琼脂平板培养基，再挑取金黄色葡萄球菌垂直于水平线画线，经37℃培养24～48小时，如果待检细菌是副猪嗜血杆菌，则在金黄色葡萄球菌菌落周围有呈“卫星生长”菌落。

另外，脲酶试验（-）、氧化酶试验（-）、接触酶试验（+）、硝酸还原试验（+）、聚合酶链反应等，亦可对副猪嗜血杆菌做出鉴定[6]。

2..3　比较鉴定

副猪嗜血杆菌病在鉴定中极易与猪败血性链球菌病相混淆，应注意比较鉴定。

副猪嗜血杆菌病和猪败血性链球菌病的相同点：

从致病机理方面，这两种病的病原菌毒素都是以主要侵害血管壁内膜细胞，引起局部微循环小血管和毛细血管扩张，血管通透性增大为主；从组织器官病理变化方面，都出现纤维素性渗出性关节炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎，实质性器官都发生局灶性淤血、充血、出血，后期都有败血症病变；从临床表现方面，都有可视黏膜发绀、发热、厌食、震颤、共济失调、反应迟钝、呼吸困难、关节肿胀、跛行、母猪流产等症状；从病理组织镜检方面，病灶组织镜检都可见渗出性浆液和纤维素、中性白血球、单核球、淋巴球甚红血球至浸润；从病原的存在方面，都可存在健康猪的鼻腔黏膜或扁桃体隐窝；从对药物的敏感性方面，都对青霉素、磺胺等药物敏感。

副猪嗜血杆菌病和猪败血性链球菌病的不同点：从病原方面，副猪嗜血杆菌为杆状，革兰氏染色阴性，猪败血性链球菌病的病原猪链球菌为球形，革兰氏染色阳性；从易感猪群方面，副猪嗜血杆菌多感染幼龄猪只，特别是高度健康的猪和不带特异病原的猪易感，猪败血性链球菌感染猪只则不分年龄类群；从病理变化方面，副猪嗜血杆菌病猪心肌不扩张松弛、没有化脓性脑膜炎病变，猪败血性链球菌病猪心肌扩张松弛、有化脓性脑膜炎病变；从临床症状方面，副猪嗜血杆菌病的病猪无惊厥现象、视觉听觉正常，猪败血性链球菌病的病猪有惊厥、失明、失听现象。另外，还可以作特异性病原学鉴定[养殖网:www.nczfJ.com/]。

3　处理

对早期病或病情较轻的病猪，应及时隔离，同时用口服和注射较大剂量的诱导内毒素释放少的抗菌药物如强效嗜血康等进行治疗，同群没有症状的猪，可以在饮水或饲料中添加畜禽健、强效阿莫仙等药物进行保健预防性处理；对污染的环境可用常规消毒液进行消毒；对晚期的或病情严重的病猪作急宰处理。

对急宰病猪，内脏器官进行销毁，肉体可炼制工业油；对病死猪的肉尸作化制处理。

4　预防措施

适当扩展猪只活动空间，消除现代工厂化设施养猪场中猪只活动空间过于紧窄而使猪只必须的生物习性活动受限所导致的精神不愉快性应激反应的发生。同时，在生猪运输过程中要注意避免因车箱船舱通风不良和猪只挤压而造成猪只生存性应激反应的发生。

建立完善生产猪场的检疫防疫机制与工作档案。平时应定期对猪群作副猪嗜血杆菌带菌检查，引进外来猪只时要重点实施开展对副猪嗜血杆菌带菌检查。对查出有带菌的猪要严格实施隔离与治疗处理。

参考文献：

[1]　陈溥言.兽医传染病学第五版[M].北京：中国农业出版社，2009：264-265.

[2]　李静怡，张建民，徐成刚，等.副猪嗜血杆菌主要毒力因子与致病机理的研究进展[J].中国畜牧兽医，2010，37（12）：173-176.

[3]　郭萌，李冠民，黄清泉，等.细菌内毒素研究进展[J].中国实验动物学报，2009，17（5）：397-401.

[4]　马广鹏.副猪嗜血杆菌毒力因子研究进展[J].动物医学进展，2013，34（2）：83-88.

[5]　马学恩.家畜病理学[M].北京：中国农业出版社，2011：299-230.

[6]　李仕新，黄彩梅，陈国开，等.副猪嗜血杆菌检测技术的研究进展[J].中国动物检疫，2011，28（3）：78-80.