农村散养牛口蹄疫两个滴度抗体水平调查结果

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的传染病，主要侵害偶蹄动物，具有急性、热性及高度接触性特点。我国农业部在2008年发布的《一、二、三类动物疫病病种名录》中把口蹄疫列入一类动物疫病名录，在2013年发布的《国家中长期动物疫病防治规划(　2012　-　2020)》中口蹄疫（包括A型、亚洲I型、0型）列为优先防治的国内动物疫病之一及口蹄疫（包括南非1型、南非2型、南非3型）为重点防范的外来动物疫病之一，本次调查于2016年11月在柳城县某农村采集10份散养牛血样运用液相阻断一酶联免疫吸附法进行口蹄疫0型抗体和口蹄疫亚洲I型抗体检测，并且对比口蹄疫0型抗体在1:　128和1:　256滴度时的效价情况和口蹄疫亚洲I型抗体在1:　128和1:　256滴度时的效价情况。

1、材料与方法

1.1　血清样品

　2016年11月在柳城县某农村选取10户已进行口蹄疫0型一亚洲1型双价苗强制免疫的牛散养户，每户采集l头牛10　mL血样，分离血清后取上清液置2～8℃冰箱冷藏备检。10份牛血清分别标记Bl、B2、B3、B4、B5、B6、B7、B8、B9、Bl0。

1.2　检测试剂与设备

口蹄疫0型抗体液相阻断ELISA检测试剂盒，兰州兽医研究所，批号：201608111-5，有效期：20170210。口蹄疫亚洲I型抗体液相阻断ELISA检测试剂盒，兰州兽医研究所，批号：20160831152　-2，有效期：20170228。低速离心机（上海医用离心厂LD5-　2A）；单道可调移液器（上海科华实验系统有限公司402045，20～200μL）；八道可调移液器(德国BRAND公司，07G95359，s～so　μL)；生化培养箱（上海跃进医疗嚣械厂SPX-150）；酶标仪（普诺信达PNXD-　M96）。

1.3　方法与标准

GB/T　18935　-　2003液相阻断一酶联免疫吸附试验(　LpB-　ELISA)。检测步骤按照试剂盒使用说明书进行。

试验成立条件：阴、阳性和可疑性按试剂盒说明书上判断为依据；牛口蹄疫0型抗体效价大于1:　128判定为口蹄疫0型免疫抗体阳性；牛口蹄疫亚洲I型抗体效价大于1：128判定为口蹄疫亚洲I型免疫抗体阳性；群体合格率标准为免疫合格个体数量占群体总数的70%以上。

2、抗体水平检测结果

3分析

牛口蹄疫0型抗体效价1：128以上合格，根据表1可知，口蹄疫0型抗体效价1:　128时合格率为80%，大于农业部标准70%的群体抗体合格率，口蹄疫0型抗体合格率达标，表明散养牛口蹄疫0型抗体免疫效果良好；牛口蹄疫亚洲I型抗体效价1:　128以上合格，根据表1显示，口蹄疫亚洲I型抗体效价1：128时合格率为60%，小于农业部标准70%的群体抗体合格率，口蹄疫亚洲I型抗体合格率不达标，表明散养牛口蹄疫亚洲I型免疫效果不好。

10头散养牛中有6头的口蹄疫0型抗体在1：128和1:　256中都呈阳性，有2头的口蹄疫0型抗体在1：128中呈阳性，1：256中呈阴性，还有2头的口蹄疫0型抗体在1：128和1:　256中都呈阴性；10头散养牛中有6头的口蹄疫亚洲1型抗体在1:　128和1:　256中都呈阳性，有4头的口蹄疫亚洲I型抗体在1:　128和1:　256中都呈阴性。表明注射口蹄疫0型一亚洲I型双价疫苗后产生的0型抗体比亚洲I型抗体稳定，0型抗体合格率比亚洲I型抗体合格率高。

现在农村散养户给牛免疫的口蹄疫疫苗一般为口蹄疫0型一亚洲I型双价苗，根据检测结果可知口蹄疫0型一亚洲I型双价苗免疫后，亚洲I型抗体产生不稳定。另外，农村村防员防疫技术可能不高也是造成免疫抗体水平不高的一个原因，建议增加二次免疫，提高口蹄疫0型和亚洲I型抗体合格率。